HotStartTaqDNApolymerase(含預混Mg2+的10xTaqBuffer)

產品特點

Hotstart Taq Plus DNA Polymerase 是抗 Taq 單克隆抗體修飾的熱啟動酶，高溫加熱前，抗 Taq 單克隆抗體與 Taq 聚合酶結合從而抑制聚合酶的活性，達到抑制低溫條件下由引物的非特異性退火或引物二聚體引起的非特異性擴增作用。當擴增反應體系被加熱到95°C 2 min 時，聚合酶活性因抗 Taq 單克隆抗體變性而得到恢復，因此無需特殊失活處理，在常規(guī) PCR 反應條件下即可使用�？蓱�用于熱啟動 PCR，擴增復雜模板，低拷貝目的片段擴增。

使用方法

（注 意：以下舉例為常規(guī)PCR反應體系和反應條件，實際操作中應根據(jù)模板、引物結構和目的片段大小不同進行相應的調整和優(yōu)化）

1. PCR 體系：

推薦體系（50μl）

注 意：

A 引物濃度請以終濃度 0.1-1.0μM 作為設定范圍的參考。擴增效率不高的情況下，可提高引物的濃度；發(fā)生非特異性反應時，可降低引物濃度，由此優(yōu)化反應體系。

B 鎂離子濃度請以終濃度 1.5-3mM 作為設定范圍的參考�？筛鶕�(jù)不同的引物對和模板來調節(jié)鎂離子濃度，由此優(yōu)化反應體系）

2. PCR 程序

注 意：

a 一般實驗中退火溫度比擴增引物的熔解溫度 Tm 低 5℃，無法得到理想的擴增效率時，適當降低退火溫度；發(fā)生非特異性反應時，提高退火溫度，由此優(yōu)化反應條件。

b 延伸時間應根據(jù)所擴增片段大小設定，Hotstart Taq Plus DNA Polymerase 的擴增效率為 1 kb/30 sec。

C 可根據(jù)擴增產物的下游應用設定循環(huán)數(shù)。如果循環(huán)次數(shù)太少，擴增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，錯配機率會增加，非特異性背景嚴重。所以，在保證產物得率的前提下，應盡量減少循環(huán)次數(shù)）

HotStartTaqDNApolymerase(含預混Mg2+的10xTaqBuffer)

3. 結果檢測：

反應結束后取 5 μl 反應產物，加入適量上樣緩沖液后進行瓊脂糖凝膠電泳檢測。

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