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中文名稱：大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B（SP-B）elisa試劑盒英文名稱: Rat associated protein B,SP-B ELISA Kit

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大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B（SP-B）elisa試劑盒 實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：1.儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。2.緩沖液使用：加5ul的緩沖液于50ul的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時(shí)備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）。3.洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B（SP-B）elisa試劑盒樣品收集、處理及保存1.細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。2.細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml  左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。3.血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。|4.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20  分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。5.體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。6.組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20  分鐘，收集上清進(jìn)行檢測。7.樣品中不能含有NaN3，因NaN3  抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。8.保存：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B（SP-B）elisa試劑盒  操作步驟：1.取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30分鐘。2.分組：取出 96孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6個(gè)濃度）、空白孔、待測樣品組。注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。3.加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 100ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 100ul的蒸餾水；其余微孔中加入100ul的待測樣本。4.加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 50ul的酶標(biāo)溶液（空白對照孔除外）。5.溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育1小時(shí)。6.洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5次，用吸水紙徹底拍干。7.顯色：各孔加入顯色劑A液50ul后，再加入顯色劑B液50ul。8.終止：25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘，加入50ul終止液。9.讀板：在450nm波長讀取各孔的OD 值。 注：讀板時(shí)必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡，讀板時(shí)間控制在終止反應(yīng)后的 30分鐘內(nèi)，以免影響準(zhǔn)確性。大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B（SP-B）elisa試劑盒  注意事項(xiàng)：1.實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。2.加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免第一孔與最后一孔間的時(shí)間間隔過大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。3.孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。4.反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。5.建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。6.建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商聯(lián)系，如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B（SP-B）elisa試劑盒 安全性1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B（SP-B）elisa試劑盒 保存條件及有效期1.試劑盒保存：2-8℃2.有效期：6個(gè)月

性能規(guī)范：

J21W/H內(nèi)外螺紋壓力表針型閥設(shè)計(jì)制造：GB/T12224-1989,JB/T7747-1995，連接形式：內(nèi)外螺紋連接，結(jié)構(gòu)特征：錐螺紋密封；活動(dòng)閥瓣，閥門檢驗(yàn)和試驗(yàn)：GB/T13927-1992。